凝血酶时间TT测定.docx

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1、凝血酶时间(TT)测定1 .实验原理凝固法确定量的血浆样本(1001),加入凝血酶时间(TT)反应试剂(501)经过一定时间(3min)加湿后，采用波长660nm的光照射样本，凝血过程中血浆的混浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定，然后通过标准曲线求出凝血酶时间。2 .标本采集2 .1早晨空腹采血(空腹12小时左右)，静脉采血。3 .23.8%(wv)枸椽酸钠0.2m1+静脉血18m1,混匀。4 .标本存放：1小时内(3000rminX15min)分离血浆，室温放置不超过2小时，28C保存不超过4小时，长时间保存需在冰冻条件下，(-70C不超过6个月)，只能冻融1次，在37C迅速解冻，以减

2、低凝血因子的消耗，解冻后立即测试。5 .标本运输：低温条件下运输。6 .标本拒收的标准：抗凝剂不符合，采血量不准确，凝固，溶血，脂血标本不能作测定O7 .实验材料：6.1德国DadeBehringMarburg公司凝血酶时间测定试剂，每瓶5m1(用配套稀释液溶解)共50人份，未开封试剂28C贮存到说明书上有效期，复溶试剂28C保存不超过7天。6.2DadeCitro1质控血浆.用蒸馈水ImI溶解后放置30分钟，才能使用或分装。复溶后，室温保存2小时，28C4小时。7.仪器设备：7. 1仪器名称：XXXCA-1500全自动血液凝固分析仪7.2仪器厂家：XX公司7. 3仪器型号：XXXCA-150

3、07.4 仪器技术参数：7.5 .1速度：最快检测速度180测试/小时，组合检测约140测试/小时.7.4.2 试剂位：36个，具冷藏功能。7.4.3 样本位：50个，可自动连续添加。7.5仪器校准程序：7.5.1 校准频率：当方法改变，试剂厂家或试剂型号改变，仪器维修影响测定结果等情况时，必须进行校准。7.5.2 校准操作：设置标准曲线分析（由仪器提供商指定工程师执行）8.操作步骤：8 .1检查前准备：9 .1.1清空废液瓶，清空反应杯抛弃槽。10 1.2添加足够反应杯（不能超出警告线）。11 1.3添加清洁液试剂，清洗用蒸储水等。12 2开机：先开打印机再开主机，开机后仪器自检，约15分钟

4、，屏幕上方“NotReady”变为“Ready”，表示仪器预热完成，进入系统准备工作状态，可进行测定。8.3输入工作清单：从主菜单选WOrk1iStIf出现第一架样本工作清单输入画面,选I1DNOEntry1输入第一个样本号一按相应实验项目名称键,并同时输入此标本的其他测试项目，若选“凝血四项（PT、APTT、Fbg、TT）,可按Profi1e#1组合选项选择，选中项目相应位置标记为“O”，选完项目后按归NTERI确认,要删除某项目时只需按该项目（按键如Fi可变为FA）即可，一用tI键，同样输入其他标本编号项目。（快速输入可用RePeatI键,输入重复标本数，复制同样项目的输入。13 4放置样

5、本：按8.3所设好的工作清单顺序将离心分离好的样本放置于样本架上，并按顺序把样本架排列于Samp1er进样器右边位置（最多同时放5架共50个样本）14 5按IStart犍开始测定:盖好遮光盖，确认仪器为准备状态（显示屏正上方显示“Ready）按IStart犍，进样开始，一测定进行，仪器显示为“Ana1ying（被选择项目背景变为“”，此时可重复8.3,8.4,继续输入其他架样本工作清单，按RigeSter1,继续确认测试任务，添加样本架继续测试，一测定完成，测定项目背景变为“”，打印机打印出测定结果，所有测定清单完成，系统恢复“Ready”状态。15 6每口维护：完成每日的测定后，关机前维护。

6、1.1.1 6.1冲冼针RinSeProbe1.1.2 清空废液瓶，和已使用过的反应杯。1.1.3 将试剂架连用试剂放入冰箱。8.7关机：先关主机，再关打印机。9.检验结果的判断与分析：9. 1仪器测定TT的线性范围在5-600秒，测定完成后仪器显示TT秒数，若不能对参数进行正确计算，将出现下列信息：*.*出现错误，不能得到分析数据.一不能计算参数+.+数值超出线性范围.9.2仪器设定TT参考范围在14-20秒，如果得不到一个正常数值，在数据的左侧将出现下列标记：*出现错误信息数据高于可报告的高限10 .质量控制：每批样本同时测定两个浓度水平（高值和正常值）的质控品，以2S为警告限，3S为失控

7、限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则详见室内质控作业指导书。11 .临床意义：11.1参考范围：14-20秒（不同厂家试剂有不同参考范围，请参照试剂说明书）11.2TT延长：患者血循环中ATTn活性明显增高，肝素增多或类肝素抗凝物质存在，如S1E、肝病肾病等，异常纤维蛋白原血症，低（无）纤维蛋白原血症，FDP增多（如DIC）,异常球蛋白增多（如MM）等。11.3TT缩短：常见于血样本有微小凝块或钙离子存在时。12.变异的潜在来源12. 1抗凝剂：草酸盐、EDTA肝素不适用于PT检查12.2 标本采集处理不当，如血与抗凝剂未充分混匀，出现凝块，混匀时过分用力，使标本溶血，造成结果变异。12.3

8、 纤溶药物的影响，如双香豆素、链激酶、尿酶等。12.4 超剂量使用肝素使凝固时间延长。12. 5FDP增加使凝固时间延长。12.6某些药物，如口服避孕药、雌激素、天门冬酰胺酶、钠络酮等影响测试结果。13.操作注意事项：干粉试剂及质控血浆溶解13. 1确认溶剂类型，一般溶解液包括：蒸储水、生理盐水、缓冲液、厂家特定溶解液，必须按说明书要求使用。13.2 溶解时，轻轻转动容器，保证干粉完全溶解，避免剧烈振荡。13.3 复溶后，室温放置5-10分钟方可使用。14.仪维护与保养14.1日常维护（见8.6）14. 2每周维护14. 2.1液路冲洗：仪器在“Ready”状态下，从主菜单按BPeeia1Me

9、nHf按Maintain-*按Rinse&Prepare-*按Execute键运行此程序完成后按RetUrn返回。14.2.2清洁仪器：定期用擦布擦干净仪器内外，包括试剂槽。14.3需要时维护：14.3.1调整压力：仪器在“Ready”状态下，以主菜单按ISPCCia1Mendf按Maintainf按PressureAdjust键，显示压力是否在其调整范围内？若不在，则打开仪器右侧相应压力调整旋钮，旋动调整好压力，再锁紧旋钮。14.3.2更换灯泡：关机一从仪器右侧取下灯泡外盖及内盖一换上好的灯泡一装上内外盖f从主菜单按Specia1MenU1f再按Maintainf按CaiibIamPf确认关上遮光盖，按WXCCUte1运行调整程序。14.3.3更换保险管：关机一从仪器左侧旋下保险盖一更换上好的保险管装上保险管盖。15.参考文献15.1XX.XX等全国临床检验操作规程第三版，东南大学出版社.15.2XXX公司xxxCAT500操作手册1998.6修订本.