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1、罗汉果有效成分提取及总黄酮含量测定目录中文摘要2Abstract书签。1前言31.1 罗汉果的研究S31.1.1 化学成分31.1.2 药理作用51.1.3 罗汉果的应用61.2 罗汉果中总黄酮的研究现状61.2.1 黄圜类化合物简介61.2.2黄酮类化合物的主要结构类型7123黄酮类化合物理化性质7124罗汉果中总黄酮类型813有效成分提取简介8131提取方法分类81.3.2 超声波辅助萃取技术91.3.3 黄酮超声波萃取91.4选腼路102实验材椰口方法102.1 实验材料102.1.1 实验仪器102.1.2 实验试药102.2 实验方法H2.2.1 对照品溶液配制112.2.2 供试品
2、溶液配制112.2.3 测定波长的螃H2.2.4 标准曲线蝴112.3 方法学考察12231精密度实验122.3.1 屣性实验122.3.2 重复性实验122.3.3 回收实验12235含量测定123实瘫果123.1 线性回归方程建立123.2 方法毒则实域果133.2.1 精密度实瘫果133.2.3 靛性实3维果133.2.4 重复性实验结果143.2.5 回收实验结果143.2.6 样品含量测定实验结果154.结论15参考文献中文摘要目的:建立对罗汉果果实、茎和叶中总黄酮的含量测定的方法并对其含量进行方法:利用紫外-可见分光光度法,以山奈昔作为对照,用氯化铝为显色剂进行测定。结果:罗汉果中
3、总黄酮含量测定结果为:在果实提取物中含量13.97mgg,在茎提取物中含量302mgg,在叶提取物中含量58.52mg/g。方法学考察结果显示,仪器精密度良好,供试品溶液在8小时内显色相对稳定,实验方法重复性良好、可靠性较强。结论:罗汉果不同部位提取物中的总黄酮含量大小依次为叶、果实、茎。这为筛选罗汉果的入药部位及临床应用提供科学依据,有利于罗汉果资源的综合利用极其产业的发展。关键词:罗汉果;总黄酮;紫外-可见分光光度法;含量测定1前言1.1罗汉果的研究现状罗汉果(Siraitiagrosvenorii(Swing1e)C.JeffreyexA.M.1uetZ.Y.Zhang)为多年生攀踊本植
4、物罗汉的成熟果实。罗汉果果实可以用作食品或药品的非糖甜味剂,对于不能食用糖类的患者来说,罗汉果不失为一种较好的替代品,可以切碎煎汤代茶饮,或作保健饮料用,可以清咽消肿,保护嗓子”2。111化学成分1.1.11三葩皂昔类在罗汉果中三菇皂昔类的成分已检测出30多种,可以利用比色法进彳亍测定13jo罗汉果中三砧皂甘类成分具有抗肿瘤、降血糖、降血脂等药理活性。表1-1罗汉果中的部分三菇皂苗类成分序号化合物分子式分子量1罗汉果皂首EC42H72O)4801.012罗汉果甜甘VC60H102O291287.433光果木鳖皂昔InC48829963.164罗汉果皂首VC6H1o2O291287.55罗汉果皂
5、昔IVC54H92O241140.686罗汉果皂昔InA1C4H82j9963.157赛门昔IC54H92O241125.2910II-O罗汉果皂首VC6H(X)291285.421.1.1.2黄酮类罗汉果中的黄酮类成分可以用液相色谱法进行测定。表1-2罗汉果中部分黄酮类成分1罗汉果黄素C33H40O19740.6642棚皮素C5H10O7302.2363山泰酚C5H06286.234黄酮首元山泰酚-5山奈酚3,7-1二鼠李糖苜C27H30O14578.526山奈酚3,7Q-1二鼠李糖昔C27H30O14578.527山泰酚-3-0-1-鼠李糖昔-8榴皮素-7-0-1-鼠李糖昔-9榔皮素-3-
6、0-0-D-葡萄糖-7-0-1-鼠李糖甘-1.1.1.3多糖类水溶剂提取法可以对罗汉果中的多糖进行提取“支表1-3罗汉果中的多糖组成序号化合物分子式分子量1阿拉伯糖C5HI0O5150.132甘露糖QH2O6180.1563葡萄糖C(iH26180.164半乳糖CH26180.165葡萄糖醛酸CbHioCh194.146半乳糖醛酸CeHioCh194.14匕例阿拉伯糖:甘露糖:葡萄糖:半乳糖:葡萄糖醛酸:半乳糖醛酸=1:1.92:3.98:7.63:1.85:7.34E1.11.4油脂类王文成等通过超临界Cc)2萃取处理罗汉果,并应用气质联用技术对其中的油脂类成分进行分析。表1-4罗汉果中部分
7、油脂类成分序号化合物分子式分子量1棕相酸甲酯C172270.002棕相酸乙酯C18362284.483亚油酸甲酯C19H34O2294.474硬脂酸甲酯C19382298.515十四烷C1430198.396亚油酸乙酯C20H36O2308.4997亚油酸C18H32O2280.448N-甲酰脱乙酰秋水仙碱C2IH23NO6385.419正二十三烷C238324.6310亚麻三烯-11亚麻酸乙酯C20H34O2306.48123.滨-7-甲基I-金刚烷按酸-13二甲基烯丙基硅烷C5Hi2Si100.2414二十五烷C25H52352.6815二十烷C20H42282.5516芥酸酰胺C22H4
8、3ON337.5817角鲨烯C30H50410.718二十九烷C29H60408.6019胆留醇丁酸酯C3H52O2456.74I .1.1.5其他成分在罗汉果中还含有其他多种丰富的化学成分,如氨基酸、蛋白质、无机盐、维生素等u4112药理作用罗汉果具有止咳祛痰、降血脂、降血糖、抗氧化、抗炎、抗癌、抑制肿瘤、抑菌、保肝、降酶、清除自由基、调节机体免疫力、治疗糖尿病等多种药理作用“4-151OII .2.1保肝周海银等I网研究表明罗汉果中的罗汉果皂苜V1能够有效地减轻脓毒症小鼠的急性肝损伤。1.1.1.1 糖尿病利用罗汉果总皂昔对2型糖尿病模型小鼠进行治疗,发现罗汉果总皂甘对2型糖尿病模型小鼠的
9、食量、饮水量、尿量、空腹血糖值、胰岛素、丙二醛、总胆固醇、甘油三酯、尿素氮、肌好水平均有所降低,并且可以显著升高过氧化氢酶活性、超氧化物歧化酶活性、高密度蛋白胆固醇水平,使机体的抗氧化应激能力增强同时可以使肝肾功能有所改善“巴1.1.2.3 抗炎抑菌何怡、梁硕等g2。1研究表明,罗汉果中具有多种活性成分可以抗炎、抑菌,且提取物均可以在一定程度上抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、曲霉等细菌。1.1.2.4 抗癌黄琰菁等利用油酸对肝细胞癌HepG2细胞脂肪积累进行诱导从而对脂肪变形细胞建立模型利用罗汉果醇进行治疗,对治疗后的模型进行测定,研究表明,罗汉果醇可以抑制脂肪酸合成,调节脂代谢。1.1.3罗汉
10、果的应用罗汉果在医药、食品、保健品等方面具有广泛的应用P3在食品方面,可以利用酸杨桃和罗汉果为主料和辅料进行制备酸杨桃罗汉果复合饮料团,用山楂叶和罗汉果进行配比可以制作罗汉果味山楂叶茶饮料网;符罗汉果的提取物和茶叶提取液进行配比能够制成具有一定功效的罗汉果红茶保健饮料网,利用罗汉果可以制成适合高血糖以及糖尿病病人食用的保健品。1.2罗汉果中总黄醺的研究现状1.2.1 黄醺类化合物简介黄酮类化合物具有多种生物活性特点,如抗氧化性、抗菌、抗病毒、抗癌症、抗衰老、抑制高血压、高血脂及预防心脑血管疾病等作用,因此,对黄酮类化合物的研究和利用越来越多的人对其中的研究受到重视,在当今科学界抑菌、抗衰老的领
11、域具有十分重要的意义和价值,其在食品、医药、保健品和化妆品等领域的应用具有广阔的前景。合成黄酮与植物中提取的黄酮相比,植物种提取耗时耗力,成本还过高,但是人们却喜欢纯天然的,就只能找一种既能满足人们要求,又能降彳氐成本的一种方法,且得率高的工艺,本发明解决这样的问题。黄酮类化合物大多数都存在大自然中,是一种化合物,是天然酚类化合物之首。由于它发现早而且还大多具有颜色所以称它为黄圉或者是黄酮体。1.2.2黄阑类化合物的主要结构类型123黄醺类化合物理化性质黄酮类化合物的大多都是结晶,少部分则是粉末,由于黄酮类化合物颜色与相关的性质有关,所以决定了它的颜色变化,一般都呈现黄色和橙黄色,但是有少数比
12、如二氢黄酮类化合物、二氢黄酮醇却没有颜色,花青素及其苜元的颜色会随着PH的大小发生变化,一般会表现为红色。黄酮类化合物大多都不溶于水,但是溶于有机溶剂中。羟基卡林处理后,解决了等溶剂溶解困难,乙舐、氯代甲酸酯、氯代苯甲酸乙酯等难溶于水,苯和其他有机溶剂。甲苯胺和二甲基甲苯。一些黄酮类化合物在紫外线(24nm或365nm)下显示不同的颜色荧光,特别是在处理氨蒸气或碳酸钠溶液时,许多黄圜类化合物可形成铝、镁、铅或错盐和有色络合物。1.2.4 罗汉果中总黄醺类型黄酮类化合物具有抑制肌肉萎缩、减轻疼痛、减少脑组织神经损伤、改善学习记忆功能障碍、治疗心血管疾病、减轻溃疡性结肠炎、抗胃溃疡、改善功能性消化
13、不良、抑制回肠运动、保护胃黏膜、抗脂质过氧化、保护生殖器官、类雌激素、抗肿瘤、抗菌、抗病毒、改善糖尿病等多种生理功能.。罗汉果中总黄酮具有抗脑血栓、抗血小板聚集、抗凝血、降血糖及血脂等作用28-29O13有效成分提取简介黄酮类化合物的提取方法基本包括6种方法,这6中方法各自有各自的优缺点,它们是:醇提取法、微波提取法、超临界萃取技术、酶解法、膜分离提取法和超声波辅助萃取技术。这6中方法跟随它们的优缺点也在不同的地方被使用。131提鲂粉类醇提取法是最常见的一种提取方法,也是最为多见的一种,可以运用有机溶剂进行提取,为了节约资源,大多都是通过乙醇这中有机溶剂进行提取。微波提取法它的有点是节约能源,
14、保护生态环境,对一些特殊的提取可以经常用到此类技术方法,它的别名又叫做微波萃取技术,常常被大家广泛运用与提取过程中。超临界萃取技术是一种纯天然的提取方法,也是被我们常用到的提取方法,本次实验过程中我们就会用到这种超临界萃取法,它既可以进行药物提取也是一种分离化合物的基本手段,里面没有有机溶剂的残留是它最大的优点。酶解法酶是一种较高选择性的化合物,所以对于不同的提取材料,也要选择不同酶进行提取,这样既能提高提取率又能节省时间,是一种非常完美的辅助法提取方法。膜分离提取法和酶解法相似也是一种辅助提取技术,膜分离它是通过一种叫超滤法的分离技术,招我们所需要的黄酮化合物进行分离提取,这种超滤法它操作简单安全性高,它不会破坏我们所需活性成分的分子结构,而且组装的这种超滤装置还能反复使用,既节约资源又保护环境。1.3.2 超声波